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武漢思特進(jìn)-亞細(xì)胞定位

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    2020-7-16

夏經(jīng)理
15002786799 | 027-87381761    商盟通會(huì)員
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  • 單位地址| 湖北省武漢市江夏區(qū)高新四路40號(hào)葛洲壩
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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司提供武漢思特進(jìn)-亞細(xì)胞定位。






武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的-公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原-白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、-、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。





磷(phosphorus, p)是植物生長(zhǎng)發(fā)育必需的大量營(yíng)養(yǎng)元素之一,廣泛地參與到植物體內(nèi)的能量轉(zhuǎn)移、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、光合作用等過程。它還是許多生物大分子如-、磷脂和含磷蛋白酶類的重要組成部分。然而,由于p在土壤中容易被固定和沉淀,且植物從土壤中吸收的主要是無機(jī)態(tài)正磷酸鹽(phosphate, pi),故相對(duì)于其他營(yíng)養(yǎng)元素,p在土壤中的移動(dòng)性和有效性均很低,其也因此常常成為農(nóng)田及自然生態(tài)系統(tǒng)中植物生長(zhǎng)的主要-因子之一。植物在漫長(zhǎng)的進(jìn)化過程中發(fā)展出了一套適應(yīng)缺磷環(huán)境的形態(tài)變化及生理生化方面的機(jī)制,包括根系構(gòu)型的改變、酸性磷酸酶、rna酶及有機(jī)酸的分泌、與叢枝菌根-(amf,亞細(xì)胞定位, arbuscular mycorrhizal fungi)形成共生體系等等。

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由稻瘟菌(magnaporthe grisea)引起的稻瘟病是重要的水稻病害之一。以研究稻瘟菌致病基因?yàn)橹行,探討致病相關(guān)基因的種類及其功能,生理小種和致病基因的關(guān)系,致病基因的遺傳分離和在群體中的轉(zhuǎn)移規(guī)律等等,能夠?yàn)樗究刮列匝芯亢偷疚敛』瘜W(xué)-、生物-提供理論基礎(chǔ)。 本研究利用在實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)建成的根癌農(nóng)介導(dǎo)的稻瘟菌t-dna插入突變體庫,挑選了7個(gè)致病力缺陷的突變體,提取基因組dna,pcr檢測(cè)確認(rèn)t-dna的插入。利用dw-acp-pcr(dna walking-annealing control primer-pcr)技術(shù)對(duì)t-dna右邊界側(cè)翼序列進(jìn)行擴(kuò)增,7個(gè)突變體都獲得了特異條帶。對(duì)這些特異條帶進(jìn)行并測(cè)序,其中5個(gè)測(cè)序成功,另外2個(gè)測(cè)序失敗。將成功的序列與稻瘟菌基因組和ncbi數(shù)據(jù)庫比對(duì),發(fā)現(xiàn)1個(gè)為載體pcambia1300序列,4個(gè)與稻瘟菌的基因組相似性達(dá)93%~99%,認(rèn)為是t-dna插入位點(diǎn)的側(cè)翼序列。

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目的研究1個(gè)白木香倍半萜合酶(ass)的亞細(xì)胞定位,確定其功能區(qū)域,并比較3種瞬時(shí)表達(dá)體系在亞細(xì)胞定位研究中的優(yōu)劣。方法從白木香愈傷組織中提取總rna,采用特異引物rt-pcr方法倍半萜合酶ass基因,并連接于pezs-nl載體和pfgc5941gfp改造載體上,分別構(gòu)建pfgc5941-gfp-ass、pezs-nl-ass-gfp 2種植物表達(dá)載體,分別利用根癌農(nóng)侵染葉片、基因槍轟擊洋蔥表皮細(xì)胞、peg轉(zhuǎn)化白木香原生質(zhì)體3種技術(shù)進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)化表達(dá),激光共-顯微鏡下觀察表達(dá)出的綠色熒光蛋白(gfp)融合蛋白的亞細(xì)胞定位。結(jié)果在葉片表皮細(xì)胞、洋蔥表皮細(xì)胞及白木香原生質(zhì)體中,融合蛋白綠色熒光均能被觀察到。ass基因與gfp的融合蛋白產(chǎn)物在葉片中定位于胞質(zhì),在洋蔥表皮中定位于胞質(zhì)和細(xì)胞核,白木香原生質(zhì)體中定位于胞質(zhì)和質(zhì)體。結(jié)論 ass基因在白木香原生質(zhì)體胞質(zhì)及質(zhì)體定位;對(duì)3種體系的結(jié)果比較表明,應(yīng)用不同體系研究蛋白的亞細(xì)胞定位可能出現(xiàn)不同的結(jié)果,這可能與同源或異源表達(dá)的植物細(xì)胞的特性有關(guān)。
武漢思特進(jìn)(多圖)-亞細(xì)胞定位由武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司提供。武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司(www.stbio.com.cn)為客戶提供“動(dòng)植物,-,細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)”等業(yè)務(wù),公司擁有“思特進(jìn)”等品牌,-于辦公、文教項(xiàng)目合作等行業(yè)。歡迎來電垂詢,聯(lián)系人:夏經(jīng)理。


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