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試劑制備
1x assay/lysis buffer：實驗前用去離子水將5x的assay/lysis緩沖液稀釋成1x的緩沖液，并在使用前加入蛋白酶抑制l劑如1 mm pmsf， 10 μg/ml leupeptin（亮肽素），或 10 μg/ml aprotinin（抑肽酶）。
樣品處理
貼壁細胞
1. 培養(yǎng)細胞密度達到大約80%-90%之間（直徑10 cm培養(yǎng)皿，~107個細胞），并用活性劑或抑制l劑進行處理。
2. 吸去培養(yǎng)基并用冰冷的pbs洗滌兩次。
3. 向細胞中加入1x assay/lysis緩沖液（每個直徑10cm的組織培養(yǎng)皿中加入0.5-1ml）。
4. 將培養(yǎng)皿放置于冰上處理10-20分鐘。
5. 用細胞刮棒把細胞從培養(yǎng)皿下分離下來。
6. 將細胞裂解物轉(zhuǎn)入合適的管中并放置于冰上。
7. 如果核發(fā)生裂解，細胞裂解物可能會變得非常的粘稠并且難以吸取。當這種情況出現(xiàn)時，將細胞裂解物用27?的注射l器針頭來回吸取3-4次，以破壞基因組dna，從而避免上述情況的出現(xiàn)。
8. 4°c 12000 g，ip-wb活性檢測試劑盒， 離心10 min。
9. 收集上清（~1-2 mg總蛋白）并放置于冰上使用。如果樣品不立即使用，請將處理后的樣品存放于-70°c條件下。
這些抗arf 6-gtp單克l隆抗l體還可用于通過免l疫組織化學監(jiān)測細胞和組織中arf 6的激l活。
neweast biosciences arf6激l活測定試劑盒提供了一種簡單且快速的方法來監(jiān)測arf 6的激l活。每個試劑盒均提供足夠的量以執(zhí)行20個測定。
neweast biosciences arf 6激l活檢測試劑盒基于特定于配置的抗arf 6-gtp單克l隆抗l體，可從細胞提取物或體外載有g(shù)tpγs的arf 6激l活檢測方法來測量活性arf 6-gtp水平。 簡而言之，抗活性的arf 6小鼠單克l隆抗l體將與含有arf 6-gtp的細胞裂解液一起孵育。 然后，結(jié)合的活性arf 6將被蛋白a / g瓊脂糖拉低。 分別使用抗arf 6兔多克l隆抗l體通過免l疫印跡分析檢測沉淀的活性arf 6。
武漢紐斯特生物科技有限公司（wuhanneweastbiotechonologyco.ltd），系美國生命科學試劑供應商美國neweastbio在的子公司。公司位于武漢東湖-開發(fā)區(qū)光谷生物城.美國neweastbio-于生命科學和生物技術(shù)領域，主要產(chǎn)品有小分子、elisa試劑盒、蛋白等，與高校和研究所、大制藥公司、生物科技公司和醫(yī)院等客戶建立了長期穩(wěn)定的合作關(guān)系，產(chǎn)品銷往全球。
產(chǎn)品描述
arf6（adp-核糖基化因子6）是arf超家族的成員。 arf基因編碼小的gtpases，它們會增加霍l亂毒l素的adp-核糖基轉(zhuǎn)移酶活性，并且對于作為磷脂酶d的激l活劑的囊泡運輸-。alf6調(diào)節(jié)膜運輸并起吞噬作用的調(diào)節(jié)分子的作用。
ip-wb活性檢測試劑盒-武漢紐斯特(商家)由武漢紐斯特生物技術(shù)有限公司提供。武漢紐斯特生物技術(shù)有限公司是從事“g蛋白活性,camp和c- elisa試劑盒,蛋白點突變”的企業(yè)，公司秉承“誠信經(jīng)營，用心服務”的理念，為您提供高的產(chǎn)品和服務。歡迎來電咨詢！聯(lián)系人：樂經(jīng)理。
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