pcr實驗室-pcr-英瀚斯生物科技公司

mirna測序

microrna(mirna)是一種大小約21—23個堿基的單鏈小分子rna，pcr檢測，是由具有發(fā)夾結構的約70-90個堿基大小的單鏈rna前體經過dicer酶加工后生成，不同于sirna（雙鏈）但是和sirna密切相關。microrna通過和靶基因mrna堿基配對引導沉默復合體（risc）降解mrna或抑制mrna的翻譯，從而在轉錄后水平調控蛋白表達（新發(fā)現mirna也能在轉錄水平調控基因表達）。mirna在物種進化中相當保守，在動物、植物和-等中發(fā)現的mirna表達均有嚴格的組織特-和時序性。mirna在細胞生長和發(fā)育過程中起多種作用，-怎么做，包括調控發(fā)育、分化、凋亡和增殖等。

目前研究mirna的方法主要是realtime-pcr、生物芯片技術以及第二代測序技術�；�于第二代測序技術的mirna測序，pcr，可以一次獲得數百萬條mirna序列，能夠快速鑒定出不同組織、不同發(fā)育階段、不同-狀態(tài)下已知和未知的mirna及其表達差異，為研究mirna對細胞進程的作用及其生物學影響提供了有力工具。

蛋白提取

大部分蛋白質都可溶于水、稀鹽、稀酸或堿溶液， 少數與脂類結合的蛋白質則溶于-、-等有ji溶劑中，因些，可 采用不同溶劑提取分離和純化蛋白質及酶。

(一)水溶液提取法

稀鹽和緩沖系統的水溶液對蛋白質穩(wěn)定性好、溶解度大、是提取蛋白質常用的溶劑，通常用量是原材料體積的1-5倍，提取時需要均勻的攪拌，以利于蛋白質的溶解。提取的溫度要視有效成份性質而定。一方面，pcr實驗室，多數蛋白質的溶解度隨著溫度的升高而增大，因此，溫度-于溶 解，縮短提取時間。但另一方面. ，溫度升高會使蛋白-性失活，因此，基于這一點考慮提取蛋白質和酶時一般采用低溫( 5度以下)操作。為了避免蛋白質提以過程中的降解，可加入蛋白 水解酶抑zhi劑(如二yi--，碘yi酸等)。