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原位雜交-武漢思特進(jìn)

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    2021-7-14

夏經(jīng)理
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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司提供原位雜交-武漢思特進(jìn)。






原位雜交(in situ hybridization)也叫原位雜交組化(in situ hybridization histochemistry, ishh),是一種固相分子雜交的方法,bai它是用標(biāo)記的dna或rna為探針,在原位檢測組織或細(xì)胞內(nèi)特定-序列的方法。探針的種類按所帶標(biāo)記物可分為同位素標(biāo)記探針和非同位素標(biāo)記探針兩大類。常用的同位素標(biāo)記物有3h、35s、125i和32p,非同位素標(biāo)記物中目前很常用的有生物素、地高6辛和熒光素三種。探針的種類按-性質(zhì)不同又可分為dna探針、cdna探針、rna探針和合成寡核苷酸探針。

原位雜交術(shù)可在原位檢測細(xì)胞合成某種多肽或蛋白質(zhì)的基因表達(dá),有-的敏感性和特-,已成為細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)研究的重要手段。



原位雜交;原位雜交(in situ hybridization)將標(biāo)記的-探針與細(xì)胞或組織中的-進(jìn)行雜交,稱為原位雜交!

使用dna或者rna探針來檢測與其互補(bǔ)的另一條鏈在-或其他真核細(xì)胞中的位置。

以菌落原位雜交為例:對分散在若干個瓊脂平板上的少數(shù)菌落(100-200)進(jìn)行克8隆篩選時,可采用本方法。將這些菌落歸并到一個瓊脂主平板以及已置于第二個瓊脂平板表面的一張硝5酸纖維素濾膜上。經(jīng)培養(yǎng)一段時間后,對菌落進(jìn)行原位裂解。主平板應(yīng)貯存于4℃直至得到篩選結(jié)果。



在選用探針時經(jīng)常會受到可利用探針種類的-。如在建立dna-時,手頭沒有篩選特定基因的克0隆探針,這時就可用寡核苷酸探針來代替。但必須首先純化該基因的編碼蛋白,并測定6個以上的末端-酸序列,通過反推的核苷酸序列合成一套寡核苷酸探針。如果已有其它動物的同種基因克0隆,因?yàn)槿祟惡蛣游镩g在同一基因的核苷酸順序上存在較高的同源性,因此可利用已鑒定的動物基因作探針來篩選人類基因克0隆。對于基因核苷酸序列背景清楚而無法獲得克0隆探針時,可采用pcr方法擴(kuò)增某段基因序列,并克0隆人合適的質(zhì)粒載體中,即可得到自己的探針。這種方法十分簡便,無論基因組dna探針還是cdna探針都可以容易地獲得,原位雜交,而且,可以建立pcr的-方法,與探針雜交方法可作對比,可謂一舉兩得。



原位雜交-武漢思特進(jìn)由武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司提供。武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司堅(jiān)持“以人為本”的企業(yè)理念,擁有一支高素質(zhì)的員工隊(duì)伍,力求提供-的產(chǎn)品和服務(wù)回饋社會,并歡迎廣大新老客戶光臨惠顧,真誠合作、共創(chuàng)美好未來。思特進(jìn)——您可-的朋友,公司地址:湖北省武漢市江夏區(qū)高新四路40號葛洲壩,聯(lián)系人:夏經(jīng)理。


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